Purification et propriétés des béta-D-galactosidases des N-acétyl-béta-D-glucosaminidases de Bifidobacterieum bifidum souche AA 2/2

par Laurence Appourchaux

Thèse de doctorat en Biochimie

Sous la direction de Stéphane Bouquelet.

Soutenue en 1989

à Lille 1 .


  • Pas de résumé disponible.

  • Titre traduit

    Characterization of exoglycosidases from bifidobacterium bifidum strain aa/22


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    Quatre activités exoglycosidasiques de bifidobacterium bifidum souche AA/22 ont été étudiées. Il s'agit des activités: béta-galactosidase, n-acétyl-beta-hexosaminidase, alpha-neuraminidase et alpha-fucosidase. Ces activités sont endo-cellulaires, leur extraction est réalisée par ultra-sons. Le schéma de purification suivi nous a permis d'obtenir six fractions. Trois fractions ne contenant qu'une seule activité : une alpha-neuraminidase et deux beta-galactosidases. Trois fractions possèdent chacune deux activités : une béta-galactosidase et une alpha-fucosidase ; une alpha-neuraminidase et une n-acétyl-béta-hexosaminidase ; une béta-galactosidase et une n-acétyl-béta-hexosaminidase. Toutes ces fractions ne révèlent qu'une seule bande en électrophorèse non dénaturante. Nous avons vérifié que celles-ci correspondaient bien aux activités suivies. Les deux activités béta-galactosidase purifiées séparément sont homogènes en électrophorèse dénaturante. Toutes ces activités ont des températures optimales comprises entre 40 et 48°C. Les pH optimaux sont compris entre 5 et 6. 5 et les masses moléculaires relatives déterminées en gel filtration sur Superose 6 varient de 97000 à 420000. Les pHi sont acides (4 a 5. 1). Seule une activité béta-galactosidase est sensible à l'EDTA et à l'EGTA, de plus Elle est activée par le calcium et le magnésium. Les paramètres enzymatiques des béta-galactosidases ont été réalisés sur le pNP-Gal et sur le lactose, ils mettent en évidence trois groupes de réactivité différente. Tous ces paramètres nous permettent de conclure que Bifido bacterium bifidum souche AA/22 possède au moins trois béta-galactosidases différentes. Nous n'avons pas prouvé que dans les fractions contenant deux activités, nous étions en présence d'un complexe enzymatique. Mais nous avons montré que la présence d'une activité influençait la réactivité de l'autre activité présente.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (114 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 17 f.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université des sciences et technologies de Lille (Villeneuve d'Ascq, Nord). Service commun de la documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 50376-1989-301
  • Bibliothèque : Université des sciences et technologies de Lille (Villeneuve d'Ascq, Nord). Service commun de la documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 50376-1989-302
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.