Jonctions "GAP" (ou communicantes) : utilisation d'anticorps antipeptides pour l'immunodétection et la purification de protéines jonctionnelles

par Emmanuel Dupont

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Daniel Gros.


  • Résumé

    Les jonctions gap ou communicantes sont des structures membranaires ubiquistes qui permettent le passage, entre les cellules, de molecules de faible poids moleculaire (800-900 daltons). La connexine 43 (cx 43) est la proteine majeure constitutive des jonctions communicantes du myocarde de rat. Des anticorps contre le peptide salgklldkvqsy (residus 5-17 de la cx 43) ont ete caracterises en elisa et immunotransfert, apres purification par affinite. Ils reconnaissent specifiquement la cx 43 sur les immunorepliques de fraction totale de curs de rats. Ces anticorps ont ete utilises pour: i) demontrer la conservation phylogenique de ce determinant antigenique dans les curs de differents vertebres (des poissons aux mammiferes) (mr 43 kd), ii) detecter des sequences homologues dans les fractions totales de differents organes de rat: foie, rein, uterus, estomac, cristallin, cervelet, ainsi que dans le foie de souris, iii) analyser la presence d'eventuelles liaisons disulfures dans la cx 43 sur des jonctions isolees et sur des fractions totales de curs de rats. Des anticorps contre les peptides saeqnrmgq(y) (residus 314-322 de la cx 43) ont ete caracterises de la meme maniere que les anticorps precedents. Ils reconnaissent specifiquement la cx 43, ainsi qu'une proteine de 41 kd dans une fraction totale de cerveau de rat. Ces anticorps ont ete utilises pour purifier par chromatographie d'affinite cette proteine de cerveau de rat de 41 kd. Celle-ci represente probablement une nouvelle proteine jonctionnelle specifique du tissu nerveux


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Informations

  • Annexes : 201 REF

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  • Bibliothèque : Université Aix-Marseille (Marseille. Luminy). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 16325
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