Étude du système de transcription de classe C chez la levure : analyse de mutants conditionnels de l'ARN polymérase C

par Alejandra Moenne

Thèse de doctorat en Sciences biologiques

Sous la direction de André Sentenac.

Soutenue en 1988

à Paris 11 , en partenariat avec Université de Paris-Sud. Faculté des Sciences d'Orsay (Essonne) (autre partenaire) .


  • Résumé

    This thesis concerns the study of class C gene transcription in the yeast Saccharomyces cerevisiae by taking advantage of temperature sensitive mutants affected at the level of RNA polymerase C. The mutants rpc160-20, rpc160-31and rpc160-41 carry a point mutation in the major subunit (C160) of RNA polymerase C, and the mutant RPC53::H+ carries an integrative disruption of the gene coding for the subunit C53. In vivo, the mutants display an imbalance in the synthesis of the small RNAs transcribed by RNA polymerase C : the synthesis of tRNAs is greatly diminished compared to that of 5S RNA. The structural and functional properties of the mutant RNA polymerases were examined. In vitro studies using reconstituted transcription systems showed that the C160 subunit is involved in the specific transcription of genes. In a general manner, the imbalance in the synthesis of tRNA and 5S RNA is due to a decrease in the amount of mutant RNA polymerase C in the cell, probably because of a lack of enzyme assembly. On the other band, intracellular levels of transcription factors TFIIIB and TFIIIC (τ) are not significantly reduced. Studies of the mutant rpc160-41 showed that RNA polymerase C is involved in the transcription of the gene coding for the yeast small nuclear RNA snR6 (the yeast homologue of the mamalian U6 snRNA). This gene was expressed in vitro in a transcription system that requires RNA polymerase C and TFIIIB fraction.

  • Titre traduit

    Study of class C transcription system in yeast : analysis of conditional RNA polymerase C mutants


  • Résumé

    Cette thèse porte sur l'étude du système de transcription des gènes de classe C chez la levure Saccharomyces cerevisiae en se fondant sur l'analyse de mutants thermosensibles affectés au niveau de l'ARN polymérase C. Les mutants rpc160-20, rpcl60-31 et rpc160-41 portent une mutation de la plus grande sous-unité (C160) de l'ARN polymérase C est le mutant RPC53:H+ porte une cassure intégrative du gène codant pour la sous-unité C53. In vivo, les mutants présentent un déséquilibre de la synthèse des petits ARN transcrits par l'ARN polymérase C. La synthèse des ARNt est très fortement diminuée comparée à celle de l'ARN 5S. Les propriétés structurales et fonctionnelles des ARN polymérases C mutées ont été examinées. L'étude in vitro réalisée avec des systèmes de transcription reconstitués a permis de mettre en évidence le rôle de la sous-unité C160 dans la transcription spécifique des gènes. De façon générale, le déséquilibre dans la synthèse d'ARNt et d'ARN 5S est dû à une diminution de la quantité d'enzyme dans les cellules, probablement par défaut d'assemblage de l'enzyme. D'autre part, aucune corégulation du taux d'enzyme C et des facteurs de transcription TFIIIB et TFIIIC (t) n'a été observée. Grâce au mutant rpc160-41 le rôle de l'ARN polymérase C dans la transcription du gène du petit ARN nucléaire snR6 de levure (homologue du snRNA U6 de mammifère) a été mis en évidence. Ce gène a été exprimé dans un système de transcription in vitro qui nécessite de l'ARN polymérase C est la fraction TFIIIB.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (158 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 133-158

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 0g ORSAY(1988)334
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-035181
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