Isolement et caracterisation des adnc des sous-unites h et m de la deshydrogenase lactique de lapin : etude de la regulation de l'expression des isoenzymes dans les muscles

par Catherine Sass

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Yves Briand.

Soutenue en 1988

à Clermont-Ferrand 2 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Nos travaux s'inscrivent dans le cadre de l'etude, chez le lapin, de la differenciation du type metabolique des fibres musculaires (oxydatif, glycolytique ou oxydatif-glycolytique) et plus particulierement de l'etude de l'expression de la lactate deshydrogenase (ldh), enzyme cle du metabolisme glycolytique, dont la distribution isoenzymatique apparait caracteristique des differents types musculaires et semble regulee au niveau de la biosynthese. Nous avons donc entrepris d'isoler des sondes nucleiques specifiques de chaque sous-unite m et h. Pour cela nous avons realise, dans le vecteur phagique gt11, deux banques d'adnc, l'une de muscle psoas major, riche en sous-unite m, l'autre de muscle cardiaque, riche en sous-unite h. Le criblage de la banque d'adnc du muscle psoas major avec une sonde de ldh-m de rat et celui de la banque d'adnc de muscle cardiaque avec des anticorps anti-ldh-h ont permis d'isoler plusieurs adncs parmi lesquels nous avons particulierement etudie, pour chaque banque, developpement post-natal. Les resultats de cette etude ont ete compare a ceux obtenus pour la quantification des proteines (par mesure d'activite enzymatique). Chez l'adulte, la distribution isoenzymatique semble uniquement regulee au niveau transcriptionnel et/ou post-transcriptionnel. Par contre la quantite globale de ldh apparait controlee essensiellement au niveau traductionnel et/ou post-traductionnel. Pendant le developpement post-natal, nous avons pu mettre en evidence de nombreuses modifications au niveau arnm et proteique, qui sont specifiques de chaque muscle et conduisent a l'elaboration des profils adultes. Les changements de distribution des sous-unites semblent, pour les muscles lents et cardiaques, comme chez le lapin adulte, regules par les quantites d'arnm de chaque sous-unite; pour les muscles rapides s'y ajouterait un controle traductionnel. De meme les activites ldh totales sont modifiees, probablement


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