Culture de cellules de lignées épithéliales de foie de rat : influence des milieux contenant ou non du serum ou totalement aprotéique sur la croissance cellulaire sur supports stationnaires ou sur microsupports sphériques en suspension dans un biogénérateur

par Frédéric Dhainaut

Thèse de doctorat en Biochimie

Sous la direction de Prudent Padieu.

Soutenue en 1987

à Dijon .


  • Résumé

    Cette étude a permis de mettre en évidence quelques paramètres physico-chimiques qui ont une influence sur la croissance cellulaire, le taux de reprise et la densité cellulaire à la confluence des cellules de lignées épithéliales de foie de rat propagées dans des boîtes de Cooper et dans des biogénérateurs dans des milieux contenant du sérum, sans sérum complétés par de l'albumine et totalement synthétique et aprotéique. La densité cellulaire inoculée, le type de microsupport utilisé et les conditions d'attachement des cellules affectent la croissance cellulaire dans les milieux contenant du sérum. Dans ce même milieu, les cellules synthétisent des facteurs qui agissent sur leurs propres mitoses déterminant la façon de renouveler les mileux dans les biogénérateurs pour que la croissance cellulaire soit maximum. Un système d'oxygénation composé d'un tube de silicone enroulé dans le biogénérateur de 2 L dans lequel peut circuler de l'air ou de l'oxygène permet un apport d'oxygène dissous efficace dans le milieu. Cet apport d'oxygène a pouir effet d'augmenter la densité cellulaire et de réduire la consommation de glucose et la production d'acide lactique par les cellules. Des effets favorables sur la croissance cellulaire ont été constatés en remplaçant dans le biogénérateur le milieu synthétique de base F10 de HAM par le MEM de DUBELCCO dans les conditions de culture sans sérum en présence d'albumine. Dans les conditions de culture sans sérum et sans protéine, cet effet favorable a été constaté aussi bien dans les boîtes de culture que dans les biogénérateurs. Pour induire l'attachement cellulaire dans ces deux conditions de culture sans sérum, l'utilisation de milieu usagé soit mélangé au milieu frais soit comme moyen de remplacement du sérum, pour le prétraitement des substratums a permis d'omettre l'addition des facteurs sériques et le prétraitement des surfaces de culture par du sérum. De même, la trypsine n'est pas nécessaire pour les repiquages dans les conditions de culture dans un milieu synthétique aprotéique dans les boîtes de Cooper car elle peut être remplacée par l'utilisation de citrate trisodique. Ce travail ouvre des perspectives à l'échelle industrielle, dans des conditions de culture économiquement rentables, de cellules dépendantes d'un support cultivées dans des milieux totalement dépourvu de sérum.

  • Titre traduit

    Effect of media with or without serum or without protein on the cell growth of rat liver epithelial cell lines in petri dishes and on microcarriers


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Informations

  • Détails : 1 vol. (207 f.)
  • Annexes : Bibliographie f. 193-206 (144 références)

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  • Bibliothèque : Université de Bourgogne. Service commun de la documentation. Section Sciences.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TDDIJON/1987/6
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