Conception d'un biocapteur spécifique des inhibiteurs de la butyrylcholinestérase : approche fondamentale et application

par Emmanuelle Mége-Chabert

Thèse de doctorat en Génie enzymatique, bioconversion et microbiologie

Sous la direction de Daniel Thomas.


  • Résumé

    Le but de cette étude est la réalisation d’un biocapteur utilisant des membranes enzymatiques artificielles, pour deux approches distinctes : - d’une part, à des fins analytiques pour la détection des pesticides du type organophosphorés et carbamates dans les milieux aqueux. – d’autre part, à des fins théoriques comme outil d’étude d’aspects fondamentaux de la catalyse en phase insoluble. L’électrode enzymatique est basée sur l’immobilisation de la butyrylcholinestérase qui est spécifiquement inhibée par les pesticides recherchés. La réaction enzymatique provoque au sein du support une modification de l’environnement ionique et électrique et de la diffusion, détectée par une électrode de type potentiométrique. Ce biocapteur rend possible l’identification non pas physico-chimique mais biologique de l’inhibiteur ; la mesure de son pouvoir anticholinestérasique donne une idée précise de sa toxicité réelle. L’optimisation du biocapteur a consisté à faire la part entre les facteurs contribuant à l’amélioration de la sensibilité et ceux contribuant à la rapidité de la réponse. Dans certains cas des seuils de 5 10-9 M ont été obtenus. La compréhension du fonctionnement théorique de l’électrode nécessite une étude approfondie du comportement cinétique de l’enzyme en solution et immobilisée. L’électrode enzymatique permet de déterminer la concentration interfaciale film-électrode en protons à l’état stationnaire. Le calcul théorique de ces concentrations d’après les équations classiques corrigées de l’effet tampon et de la dissociation de l’acide butyrique, tout deux variant avec le pH intramembranaire est en bonne coïncidence avec les résultats expérimentaux. L’expression théorique de la réponse de l’électrode est essentiellement modulée par la force ionique et le pouvoir tampon. Ceci conforte l’idée de l’importance des phénomènes de charge sur le comportement cinétique de l’enzyme immobilisée.

  • Titre traduit

    Conception of a biocaptor for the specific determination of butyrylcholinesterase inhibitors : fundamental approach and application


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Informations

  • Détails : 1 vol. (100 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 100 réf.

Où se trouve cette thèse\u00a0?

  • Bibliothèque : Université de Technologie de Compiègne. Service Commun de la Documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1986 CAH 39
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